一、試劑準(zhǔn)備 1、SDS-PAGE 試劑:見聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)。 2、勻漿緩沖液:1.0 M Tris-HCl(pH 6.8) 1.0 ml;10%SDS 6.0 ml;β-巰基乙醇 0.2 ml;ddH2O 2.8 ml。 3、轉(zhuǎn)膜緩沖液:甘氨酸 2.9 g;Tris 5.8 g;SDS 0.37 g;甲醇 200 ml;加 ddH2O 定容至 1000 ml。 4.、0.01 M PBS(pH7.4):NaCl 8.0 g;KCl 0.2 g;Na2 HPO4 1.44 g;KH2PO40.24 g;加 ddH2O 至 1000 ml。 5、膜染色液:考馬斯亮蘭 0.2 g;甲醇 80 ml;乙酸 2 ml;ddH2O118 ml。包被液(5% 脫脂奶粉,現(xiàn)配):脫脂奶粉 1.0 g 溶于 20 ml 的 0.01 M PBS 中。 6、顯色液:DAB 6.0 mg;0.01 M PBS 10.0 ml;硫酸鎳胺 0.1 ml;H202 1.0 μl。
了解詳情 >>免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Western blotting),是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測,可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達(dá)量差異。
了解詳情 >>根據(jù)衛(wèi)生部規(guī)定,HIV抗體陽性報告必須由衛(wèi)生部認(rèn)證并取得資格的艾滋病病毒抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室出具才有法律效應(yīng)。最常用的HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方法是免疫印跡法(Western Blot,WB)。HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評價:免疫印跡實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是根據(jù)硝酸纖維素條膜特異性HIV抗原位置上出現(xiàn)的帶型不同來判斷HIV抗體為陽性、陰性和不確定。
了解詳情 >>在線
咨詢
13682284641
咨詢熱線
微信咨詢
公眾號